Memanfaatkan Elektrostatik Sortase A untuk Reaksi Transpeptidasi yang Kuat

Abstrak
Transpeptidasi yang dimediasi oleh sortase merupakan reaksi biokimia yang ampuh untuk melakukan rekayasa protein. Dalam penelitian ini, kami memanfaatkan profil elektrostatik unik dari pentamutan sortase A (SrtA-5M) untuk meningkatkan transpeptidasi yang dimediasi oleh SrtA-5M dengan menggabungkan modul peptida bermuatan pendek ke dalam substrat. Yang terpenting, reaksi berlangsung dengan kelebihan nukleofil yang minimal dan berlangsung cepat serta sangat efisien dalam rentang konsentrasi substrat mikromolar rendah. Bantuan elektrostatik menghilangkan kebutuhan akan aditif atau strategi rekayasa substrat yang kompleks, sehingga memberikan cakupan yang luas. Temuan kami juga memberikan wawasan mendasar tentang pengaruh muatan substrat pada aktivitas SrtA-5M, yang membuka jalan bagi pengoptimalan lebih lanjut dari reaksi transpeptidasi yang dikatalisis oleh SrtA.