Karakterisasi mekanisme molekuler oligomerisasi CaMKKα/1

Abstrak
Kinase protein yang bergantung pada kalsium/kalmodulin (CaMKK) merupakan kinase pengaktif untuk kinase protein tipe 1 yang bergantung pada kalsium/kalmodulin (CaMKI), kinase protein tipe IV yang bergantung pada kalsium/kalmodulin (CaMKIV), kinase protein serin/treonin RAC-alfa (PKB), dan kinase protein yang diaktifkan AMP (AMPK) yang telah dilaporkan membentuk oligomer aktif dalam sel. Uji tarik-turun glutation S-transferase (GST) dari ekstrak sel COS-7 yang mengekspresikan mutan GST- dan His 6 -CaMKKα/1 menunjukkan bahwa daerah terminal-C yang mengandung urutan autoinhibitor dan pengikatan kalmodulin (CaM) (residu 438–463) diperlukan untuk homo-oligomerisasi CaMKKα/1. Hal ini dikonfirmasi oleh fakta bahwa domain C-terminal GST-CaMKKα/1 (residu 435–505) berinteraksi secara langsung dengan residu EGFP-CaMKKα/1 435–505 serta dengan CaMKKα/1 tipe liar. Khususnya, setelah mengalami oligomerisasi di dalam sel, CaMKKα/1 tidak dapat dipertukarkan antara kompleks oligomerik maupun dipisahkan oleh pengikatan Ca 2+ /CaM. Hasil ini mendukung oligomerisasi CaMKK yang stabil di dalam sel melalui asosiasi diri intermolekuler dari daerah C-terminalnya yang mengandung domain pengatur.